血液游离DNA（cfDNA）相关的临床研究与应用已经非常成熟。然而，尽管尿液作为一种可大量收集的体液样本，能够实现真正意义上的无创采集，其研究数量却远不及血液。究竟尿液cfDNA有什么特殊之处？其研究面临的挑战又是什么呢？

尿液的成分十分复杂，DNA酶的活性较高，导致核酸更加容易降解。此外，尿液中存在大量微生物，这也会导致样本失效，使得样本的采集与cfDNA的保存变得更加困难。为了应对这一挑战，EVO视讯推出了PAXgene尿液液体活检套装。该尿液采集杯可一次性收集120ml尿液样本，并通过保存管的真空负压在不开盖的情况下将样本转移到保存管中，并进行混合，操作简单、干净卫生，有效避免了开盖污染。保存管能够保持最高10ml尿液样本，利用非交联反应的保护机制，稳定尿液中的cfDNA，防止核酸酶降解，并有效抑制微生物增殖。相比于血液，尿液样本需要更加及时地进行收集和保存，因为在常规条件下，cfDNA的降解速度更快，且gDNA污染的情况更为严重。PAXgene尿液保存管支持在各种复杂条件下的样本储存与运输，包括室温、冷藏及高温等，从而极大地减少降解和gDNA污染，并抑制细菌增殖，使cfDNA的稳定性可长达10天。

尿液中的cfDNA片段相较于血液，降解程度更高且片段大小可变，这对基因组的分子研究造成了一定的阻碍。尽管尿液中DNase I的活性是血清中的上百倍，但来自美国转化基因组学研究所的研究人员发现，尿液cfDNA片段在40-120bp之间有多个显著的峰值，其模式显示81bp的主峰及10bp的周期性，这显然无法仅由DNase I的作用解释。众所周知，cfDNA的片段化与核小体结构密切相关，血液中的cfDNA大多受到核小体的保护，其特征大小为167bp，并在100-160bp区域有104bp的周期性，这与核小体结合DNA的螺旋间距密切相关。因此，研究人员推测，尿液cfDNA片段的分布可能与其独特的核小体降解模式有关，后续实验证实了该假设。实际上，由核小体介导的cfDNA全基因组分布与断裂并非随机，因此，可以利用cfDNA的末端序列特征与长度分布等信息，追溯ctDNA的组织来源。

尿液中的游离核酸浓度普遍较低，并且个体差异巨大。有研究表明，吸烟者尿液中的cfDNA含量比非吸烟者更高（女性分别为946和904ng/ml；男性分别为496和293ng/ml），而胰腺导管腺癌患者的尿液中cfDNA的平均含量为57ng/ml。因此，在研究尿液cfDNA时，通常需要投入更多的起始样品。EVO视讯经典游离核酸提取方案QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit (#55114)简化了从血清、血浆和尿液等无细胞体液中纯化游离核酸的过程，无需使用离心机或任何磁珠操作，只需搭配EVO视讯的QIAvac24真空系统，即可实现更高效、高通量的游离核酸纯化。为了更好地支持尿液cfDNA研究，该试剂盒在原有支持5ml的基础上，新增补充方案，支持最高10ml起始样本的cfDNA提取，帮助研究人员一次性获得足够的研究材料。如果需要处理更大体积的样本，还可以通过超滤浓缩后进行提取。